一个平台，三种核心应用——活细胞DEL发现、多肽筛选、靶点结合实验。Portal药物研发平台的核心逻辑简洁而有力：在药物化学投入之前，用活的、完整的细胞验证分子的真实活性。当Merck用FRET检测到了不可透膜p53多肽的阳性信号，当AbbVie确认了化合物4是传统方法可能忽略的强效抑制剂，当Portal支持以125,000个DEL分子/细胞的效率在活细胞中进行无偏好性筛选——这个平台正在将“生物学优先”从理念转化为可规模化的药物发现新范式。
平台核心能力总览
Portal药物研发平台基于机械穿孔（“Boosting”）技术，可高通量地将不透膜分子直接递送到活细胞内进行活性验证。平台支持分子类型覆盖小分子、DNA编码化合物库（DEL）、多肽（线性及环状）、蛋白质、mRNA、寡核苷酸等。核心应用场景涵盖DEL筛选、多肽发现、靶点结合实验、PROTAC发现、表型筛选等药物发现全链条。
平台设计遵循“在生物学相关环境中验证生物活性”的原则，使药物活性与透膜性脱钩，研究人员在MedChem投资之前即可获得活细胞中的真实药效数据。
活细胞DEL发现——在天然细胞环境中筛选
DEL因其DNA标签而难以透膜，传统方法只能采用无细胞生化筛选，导致靶点活性丧失或缺乏细胞环境背景。Portal平台使“胞内DEL筛选”成为可能。
关键数据： 将荧光标记的DEL探针递送至iPSC和HeLa细胞后，流式细胞术检测到高效递送。通过qPCR定量，经Portal递送DEL后的HEK293T细胞中每个细胞约含125,000个DEL分子。将多种DEL分子库递送至PBMC后，与稀释后的DEL进行测序比较，Spearman R²=0.93，证明递送无偏好性。
平台价值： 在天然细胞环境中进行DEL筛选，靶点保持正确构象和支架结构，获得更可靠的阳性苗头化合物。
活细胞多肽发现——覆盖80%此前不可触及的结构类型
多肽和大环化合物的发现长期受困于透膜难题，活细胞筛选通常仅限于可透膜的分子，排除了80%的结构类型。Portal平台无需为活细胞检测预先进行透膜优化。
关键数据： 将FITC标记的大环化合物递送至HEK293细胞后，观察到强烈且弥散的胞内分布。在96孔高通量板中测试多个浓度，细胞活力在所有浓度下均保持良好。随着大环化合物浓度升高，流式细胞术检测到信号呈线性剂量依赖性增加（R²=0.93），表明递送与装载浓度直接相关。
平台价值： 高通量效率及线性剂量响应，使透膜性与结合优化解耦，全面覆盖多肽分子的各种可能结构。
靶点结合与作用机制研究
活细胞靶点结合实验
传统靶点结合实验需要细胞裂解或透膜处理，破坏天然环境；病毒转导建立稳定细胞系使研究推迟数周甚至数月。Portal平台通过mRNA瞬时转染，在任何细胞类型（包括原代细胞）中获得活细胞数据和动力学数据。
关键数据： 在表达NanoLuc Src激酶的HeLa细胞中，将不可透膜的激酶示踪剂与激酶抑制剂共同递送，随着抑制剂浓度增加BRET信号下降，证实了实时靶点结合检测的可行性。
PROTAC发现与降解动力学
传统基于裂解液的检测或工程化细胞系无法捕捉时间动态，破坏降解机制。Portal平台将不可透膜的试剂递送至活细胞，实现实时降解监测。
关键数据： 采用HiBiT/LgBiT实验，在降解剂的动力学研究中有效测量了随时间变化的降解效果。Portal递送比洋地黄皂苷等刺激性化学试剂效果更好，观察到更明显的降解信号。
胞内蛋白相互作用（PPI）检测
Portal支持同时递送多种抗体进行胞内标记实验。在Ramos细胞中同时递送四种检测磷酸化BTK的抗体，经刺激后使用Promega Lumit免疫检测法检测到阳性信号。
Portal药物研发平台核心应用与验证状态| 应用领域 | 传统方法瓶颈 | Portal解决方案 | 验证状态 |
|---|
| DEL筛选 | 无细胞筛选，无生物学背景 | 活细胞DEL筛选，天然环境 | 概念验证完成 |
| 多肽发现 | 80%结构类型不可及 | 高通量线性剂量响应 | 概念验证完成 |
| 靶点结合 | 裂解/透膜破坏天然环境 | 实时活细胞动力学数据 | Merck验证 |
| PROTAC发现 | 4-8周/候选，20-50万美元 | 实时降解监测，活细胞动力学 | Merck/AbbVie验证 |
| 表型筛选 | 仅限工程化细胞系 | 原代、疾病相关细胞 | 验证中 |
Galaxy-i高通量集成与自动化兼容
Portal的Galaxy- i耗材可集成到现有自动化分液仪器中，在96孔和384孔板中实现一致且可重复的递送。分液时间与非递送模式相同，不造成延迟。无论是恒压式还是蠕动式分液泵均可兼容。研究级Gateway仪器上的优化参数可轻松转移至高通量Galaxy- i系统，仅需极少调整即可使用。
