核碱基修饰,第三代 NADs 修饰采用核碱基修饰。核碱基是核酸的重要组成部分,其结构的变化会影响核酸的稳定性、生物活性和免疫原性。通过修饰核碱基上的特定位点,可以大大提高核酸的稳定性和亲和力。由核碱基修饰形成的经典核苷类似物包括5-甲基胞苷(m5C)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、N7-甲基鸟苷(m7G)、假尿苷(Ψ)、N6-甲基腺苷(m6A)和 2'-脱氧-2'-氟尿苷(2'-FU)。修饰目的:1)m5C 和Ψ等修饰会降低树突状细胞中细胞因子和生物标志物的活性,帮助 mRNA 逃避免疫系统。2)、碱基修饰可以显著降低 gapmer ASO 的肝毒性。3)5'核碱基影响 AGO 与 siRNA 的结合活性,在该特定位置进行化学修饰可以提高 siRNA 结合亲和力。